TRANSCRIPTME Reverse Transcriptase (RT32)

TRANSCRIPTME jest rekombinowaną, termostabilną odwrotną transkryptazą M-MuLV (Moloney Murine Leukemia Virus) oczyszczaną z Escherichia coli. W obecności odpowiednich starterów enzym syntetyzuje komplementarną nić DNA wykorzystując jako matrycę RNA (synteza cDNA) lub jednoniciowe DNA (ssDNA).
RT32, RT32-050, RT32-050

Dostępne opcje:
SKUUnits
RT32-05050.000 U (200 U/μl)Zapytaj o ofertę
RT32-01010.000 U (200 U/μl)Zapytaj o ofertę
TRANSCRIPTME jest rekombinowaną, termostabilną odwrotną transkryptazą M-MuLV (Moloney Murine Leukemia Virus) oczyszczaną z Escherichia coli. W obecności odpowiednich starterów enzym syntetyzuje komplementarną nić DNA wykorzystując jako matrycę RNA (synteza cDNA) lub jednoniciowe DNA (ssDNA). Odwrotna transkryptaza TRANSCRIPTME charakteryzuje się podwyższoną termostabilnością, co umożliwia prowadzenie reakcji w wyższej temperaturze (optimum aktywności w temp. 50°C). Dzięki temu zwiększona zostaje wydajność i specyficzność transkrypcji regionów RNA z dużą zawartością par GC i/lub struktur drugorzędowych. Enzym nie posiada aktywności RNazy H i 3’-5’ egzonukleazy, co poprawia wydajność syntezy cDNA, umożliwiając tworzenie produktów cDNA o długości powyżej 7 kb.

 Właściwości

  • wysoka wydajność syntezy pełnej długości produktów cDNA (nawet powyżej 7 kb)
  • posiada aktywność RNA- i DNA-zależnej polimerazy DNA
  • zwiększona czułość w reakcjach RT-qPCR i RT-PCR
  • materiał wyjściowy: 10 pg do 5 µg całkowitego RNA lub 10 pg do 500 ng mRNA
  • optymalna temperatura reakcji: 50 °C
  • podwyższona termostabilność
  • nie wykazuje aktywności RNazy H oraz 3’-5’ egzonukleazy, odpowiednia do amplifikacji trudnych matryc RNA

Zawartość

– TRANSCRIPTME Reverse Transcriptase – odwrotna transkryptaza – RIBOPROTECT Hu RNase Inhibitor (RT-35) – 10x RT Reaction Buffer – bufor reakcyjny

Bufor reakcyjny 10x RT

500 mM Tris-HCl (pH 8,3), 750 mM KCl, 30 mM MgCl2, 100 mM DTT
  • synteza pierwszej nici cDNA w RT-PCR, RT-qPCR
  • synteza cDNA do klonowania i ekspresji
  • konstrukcja bibliotek cDNA
  • analiza RNA
  • tworzenie znakowanych sond do hybrydyzacji

TRANSCRIPTME Reverse Transcriptase (RT32) - Manual

 

Kontrola jakości

Preparat wolny od nukleaz (DNaz i RNaz) oraz zanieczyszczeń kwasami nukleinowymi. Produkt jest testowany w reakcjach odwrotnej transkrypcji, a następnie na otrzymanych matrycach cDNA przeprowadzono szereg reakcji PCR i QPCR.

TRANSCRIPTME Reverse Transcriptase (RT32) - MSDS

TRANSCRIPTME Reverse Transcriptase (RT32) - CoA L.645672

TRANSCRIPTME Reverse Transcriptase (RT32) - CoA L.745673

TRANSCRIPTME Reverse Transcriptase (RT32) - CoA L.766772

TRANSCRIPTME Reverse Transcriptase (RT32) - CoA L.775873

Warunki przechowywania

Wszystkie elementy zestawu należy przechowywać w temperaturze -20 °C, bez cyklu rozmrażania. Trwałość może być przedłużona przy przechowywaniu zestawu w temperaturze -70 °C.  W przypadku właściwego przechowywania i użytkowania odczynniki zachowują stabilność do upływu daty ważności.

Definicja jednostki

Jednostka aktywności to ilość enzymu wystarczająca do przyłączenia 1 nmol dTTP do nierozpuszczalnego w kwasie materiału w czasie 10 minut w temperaturze 37 °C, używając jako starter poly(A) x oligo(dT)12-18.