Dostępne opcje:
| SKU | Units | ||
|---|---|---|---|
 | RT32-050 | 50.000 U (200 U/μl) | Zapytaj o ofertę |
| RT32-010 | 10.000 U (200 U/μl) | Zapytaj o ofertę |
TRANSCRIPTME jest rekombinowaną, termostabilną odwrotną transkryptazą M-MuLV (Moloney Murine Leukemia Virus) oczyszczaną z Escherichia coli. W obecności odpowiednich starterów enzym syntetyzuje komplementarną nić DNA wykorzystując jako matrycę RNA (synteza cDNA) lub jednoniciowe DNA (ssDNA).
Odwrotna transkryptaza TRANSCRIPTME charakteryzuje się podwyższoną termostabilnością, co umożliwia prowadzenie reakcji w wyższej temperaturze (optimum aktywności w temp. 50°C). Dzięki temu zwiększona zostaje wydajność i specyficzność transkrypcji regionów RNA z dużą zawartością par GC i/lub struktur drugorzędowych. Enzym nie posiada aktywności RNazy H i 3’-5’ egzonukleazy, co poprawia wydajność syntezy cDNA, umożliwiając tworzenie produktów cDNA o długości powyżej 7 kb.
Właściwości
- wysoka wydajność syntezy pełnej długości produktów cDNA (nawet powyżej 7 kb)
- posiada aktywność RNA- i DNA-zależnej polimerazy DNA
- zwiększona czułość w reakcjach RT-qPCR i RT-PCR
- materiał wyjściowy: 10 pg do 5 µg całkowitego RNA lub 10 pg do 500 ng mRNA
- optymalna temperatura reakcji: 50 °C
- podwyższona termostabilność
- nie wykazuje aktywności RNazy H oraz 3’-5’ egzonukleazy, odpowiednia do amplifikacji trudnych matryc RNA
Zawartość
– TRANSCRIPTME Reverse Transcriptase – odwrotna transkryptaza
– RIBOPROTECT Hu RNase Inhibitor (RT-35)
– 10x RT Reaction Buffer – bufor reakcyjny
Bufor reakcyjny 10x RT
500 mM Tris-HCl (pH 8,3), 750 mM KCl, 30 mM MgCl2, 100 mM DTT
- synteza pierwszej nici cDNA w RT-PCR, RT-qPCR
- synteza cDNA do klonowania i ekspresji
- konstrukcja bibliotek cDNA
- analiza RNA
- tworzenie znakowanych sond do hybrydyzacji
[product_files type=”brochure”]
Kontrola jakości
Preparat wolny od nukleaz (DNaz i RNaz) oraz zanieczyszczeń kwasami nukleinowymi. Produkt jest testowany w reakcjach odwrotnej transkrypcji, a następnie na otrzymanych matrycach cDNA przeprowadzono szereg reakcji PCR i QPCR.
TRANSCRIPTME Reverse Transcriptase (RT32) – MSDS
[product_files type=”coa”]
Warunki przechowywania
Wszystkie elementy zestawu należy przechowywać w temperaturze -20 °C, bez cyklu rozmrażania. Trwałość może być przedłużona przy przechowywaniu zestawu w temperaturze -70 °C. W przypadku właściwego przechowywania i użytkowania odczynniki zachowują stabilność do upływu daty ważności.
Definicja jednostki
Jednostka aktywności to ilość enzymu wystarczająca do przyłączenia 1 nmol dTTP do nierozpuszczalnego w kwasie materiału w czasie 10 minut w temperaturze 37 °C, używając jako starter poly(A) x oligo(dT)12-18.
- [references]