TRANSCRIPTME jest rekombinowaną, termostabilną odwrotną transkryptazą M-MuLV (Moloney Murine Leukemia Virus) oczyszczaną z Escherichia coli. W obecności odpowiednich starterów enzym syntetyzuje komplementarną nić DNA wykorzystując jako matrycę RNA (synteza cDNA) lub jednoniciowe DNA (ssDNA).

Odwrotna transkryptaza TRANSCRIPTME charakteryzuje się podwyższoną termostabilnością, co umożliwia prowadzenie reakcji w wyższej temperaturze (optimum aktywności w temp. 50°C). Dzięki temu zwiększona zostaje wydajność i specyficzność transkrypcji regionów RNA z dużą zawartością par GC i/lub struktur drugorzędowych. Enzym nie posiada aktywności RNazy H i 3’-5’ egzonukleazy, co poprawia wydajność syntezy cDNA, umożliwiając tworzenie produktów cDNA o długości powyżej 7 kb.

 Właściwości

• wysoka wydajność syntezy pełnej długości produktów cDNA (nawet powyżej 7 kb)
• posiada aktywność RNA- i DNA-zależnej polimerazy DNA
• zwiększona czułość w reakcjach RT-qPCR i RT-PCR
• materiał wyjściowy: 10 pg do 5 µg całkowitego RNA lub 10 pg do 500 ng mRNA
• optymalna temperatura reakcji: 50 °C
• podwyższona termostabilność
• nie wykazuje aktywności RNazy H oraz 3’-5’ egzonukleazy, odpowiednia do amplifikacji trudnych matryc RNA

Zawartość

– TRANSCRIPTME Reverse Transcriptase – odwrotna transkryptaza

– RIBOPROTECT Hu RNase Inhibitor (RT-35)

– 10x RT Reaction Buffer – bufor reakcyjny

Bufor reakcyjny 10x RT

500 mM Tris-HCl (pH 8,3), 750 mM KCl, 30 mM MgCl₂, 100 mM DTT